內(nèi)皮素ELISA試劑盒切勿冷凍,避免陽光直曬。未使用完的酶標(biāo)板條應(yīng)密封,2-8℃保存,具有方便、快速、靈敏等特點(diǎn),因其性質(zhì)、使用方便、價(jià)格低廉等特點(diǎn)。
檢測(cè)中樣品的處理
1.細(xì)胞培養(yǎng)物上清:細(xì)胞培養(yǎng)物于室溫000g,離心0分鐘后收集上清,并將標(biāo)本保存于-20℃,且應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血清:標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于000g,4℃離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃,000g離心5分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
內(nèi)皮素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。