細(xì)胞污染的清除
培養(yǎng)細(xì)胞一經(jīng)污染,多數(shù)較難處理。如果污染細(xì)胞價(jià)值不大,宜棄之;有細(xì)胞株留存的或可購(gòu)置的,可在尋找原因后*消毒操作室,復(fù)蘇或重新購(gòu)置細(xì)胞,再培養(yǎng)。若污染細(xì)胞價(jià)值較大,又難于重新得到,可采取以下辦法清除。
(一)使用抗生素
抗生素對(duì)殺滅細(xì)菌較有效。聯(lián)合用藥比單獨(dú)用藥效果好。預(yù)防用藥比污染后再用藥效果好。預(yù)防用藥一般用雙抗生素(00u/mL加00μg/mL),污染后清除用藥需采用大于常用量5~0倍的沖洗法,于加藥后作用24~48小時(shí),再換常規(guī)培養(yǎng)液。此法在污染早期可能有效。所用抗生素品種除、外,還可用、、多粘菌素、四環(huán)素、等。常用400~800μg/mL或200μg/mL四環(huán)素處理,每隔2~3日換液次,傳~2代進(jìn)行治療。近年來(lái)有報(bào)道,4-氟,2-羥基喹啉(Ciprofloxacin,Cip)、截耳素衍生物(Pleu-romutilinderivative,BM-Cyclin2:BM-和四環(huán)素衍生物(BM-2)等三種抗生素單用或合用對(duì)殺滅支原體有效。這三種抗生素均用配成250X濃縮液,-20℃保存?zhèn)溆茫褂脻舛菴ip為0μg/mL,BM-為0μg/mL,BM-2為5μg/mL。使用時(shí)先吸除污染的培養(yǎng)液,加入含BM-的RPMI640培養(yǎng)液,3天后再吸除培養(yǎng)液,加入含BM-2的RPMI640培養(yǎng)液,培養(yǎng)4天,如此連續(xù)3個(gè)輪次,直至用33258熒光染色鏡檢證明已清除支原體后,再加正常培養(yǎng)液培養(yǎng)傳代3-4次。
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