進口ELISA試劑盒自問世以來,以其敏感性高,特異性強,操作簡便、安全,開創(chuàng)了免疫學(xué)診斷的在臨床診斷方面得到了廣泛的應(yīng)用。但是在它的研究、及使用中常常會碰到非特異性顯色問題,ELISA試劑盒特異性、檢驗標(biāo)本中含酶標(biāo)記物的干擾物,操作不當(dāng)?shù)纫蛩囟紩?dǎo)致這樣的結(jié)果。本文就在實驗過程中產(chǎn)生的一些原因及如何采取一些措施,消除非特異性顯色作以分析。
風(fēng)濕因子(RF)、黃疸等,類風(fēng)濕因子是可作用于多種動物以及人IgGFc段的自身抗體,多數(shù)為IgM類,能充當(dāng)抗原成分與固相及酶標(biāo)抗體反應(yīng),從而呈現(xiàn)非特異性顯色。
黃疸血標(biāo)本中常含有內(nèi)源性過氧化物酶,如用辣根過氧化物酶為標(biāo)記物,就有可能產(chǎn)生非特異性顯色。
常因樣品采集、貯存、處理不當(dāng)造成如樣品溶血,被細(xì)菌污染,標(biāo)本凝集不全等。溶血標(biāo)本,紅細(xì)胞溶解破裂,釋放出血紅素形成,而血紅素中的鐵卟啉是過氧化物酶的類似物,以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP(辣根過氧化酶),有國內(nèi)報道酶免HBsAg試劑檢測溶血標(biāo)本時可造成假陽性。如在冰箱中保存過久,其中的IgG可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。因此,血標(biāo)本在采集處理時應(yīng)小心,在冰箱中保存不易過久。
綜上所述,盡管目前上以及我國有了部分標(biāo)準(zhǔn)血清或參比血清(血清盤),但是酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)目前在技術(shù)上尚未做到標(biāo)準(zhǔn)化。受方法學(xué)及技術(shù)條件的限制,在酶聯(lián)免疫吸附測定中有時不可避免的會出現(xiàn)一定的非特異性,我們可以通過以上措施把進口ELISA試劑盒非特異性顯色降至zui低限底,從而提高檢測的特異性,并得到更準(zhǔn)確、可靠的實驗結(jié)果。
免疫測定用 (曾用名:) 標(biāo)準(zhǔn)品 50555-9003 22.8IU/支
細(xì)菌內(nèi)毒素檢查 細(xì)菌內(nèi)毒素 標(biāo)準(zhǔn)品 98 9000EU/支
細(xì)菌內(nèi)毒素檢查 細(xì)菌內(nèi)毒素 工作標(biāo)準(zhǔn)品 / 0支/盒
可用于建立動物發(fā)熱模型 細(xì)菌內(nèi)毒素 精品 50602-0202 mg/支
含量測定用 鹽酸 對照品 7202-200303 50mg
含量測定 磷酸可待因 對照品 7203-200303 50mg
含量測定 福爾可定 對照品 205-200203 00mg
含量測定 O6-單乙酰鹽酸鹽 對照品 7207-20052 20mg
含量測定 O3-單乙酰氨基磺酸鹽 對照品 7208-200508 20mg
含量測定 乙酰可待因 對照品 7209-200507 20mg
含量測定 鹽酸甲基安非它明 對照品 722-9802 20mg
含量測定 蒂巴因 對照品 726-200403 00mg
進口ELISA試劑盒
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