午夜成人影视网-午夜成人影视在线-午夜成人影院-午夜成人影院催经视频-午夜成人影院免费-午夜成人影院污-午夜成人影院在线-午夜成人影院在线观看

當前位置:首頁  >  產品展示  >  Western Blot  >  Western Blot  >  彩虹 預染蛋白質分子量標準(窄譜,2-73kDa)

彩虹 預染蛋白質分子量標準(窄譜,2-73kDa)

【概要描述】彩虹 預染蛋白質分子量標準(窄譜,2-73kDa) Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。

型號: 點擊量:782 廠商性質:代理商 更新日期:2016-01-08
產品詳情

彩虹 預染蛋白質分子量標準(窄譜,2-73kDa) Western Blot技術:
一、 原理
與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝#纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用于檢測蛋白水平的表達。
二、分類彩虹 預染蛋白質分子量標準(窄譜,2-73kDa) 現常用的有底物化學發光ECL和底物DAB呈色,體同水平和實驗條件的是用*種方法,目前發表文章通常是用底物化學發光ECL。只要買現成的試劑盒就行,操作也比較簡單,原理如下(二抗用HRP標記):反應底物為過氧化物+魯米諾,如遇到HRP,即發光,可使膠片曝光,就可洗出條帶。
三、主要試劑
、 丙烯酰胺和N,N’-亞甲雙丙烯酰胺,應以溫熱(以利于溶解雙丙稀酰胺)的去離子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和%(w/v)N,N’-亞甲雙丙烯酰胺儲存液丙稀酰胺29g,N,N-亞甲叉雙丙稀酰胺g,加H2O至 00ml。)儲于棕色瓶,4℃避光保存。嚴格核實PH不得超過7.0,因可以發生脫氨基反應是光催化或堿催化的。使用期不得超過兩個月,隔幾個月須重新配制。如有沉淀,可以過濾。
2、 十二烷基硫#鈉SDS溶液:0%(w/v)0.gSDS,mlH2O去離子水配制,室溫保存。
3、 分離膠緩沖液:.5mmol/L Tris-HCl (pH8.8):8.5gTris和48mlmol/L HCl 混合,加水稀釋到00ml終體積。過濾后40℃保存。
4、 濃縮膠緩沖液:0.5mmol/L Tris-HCl (pH6.8):6.05gTris溶于40mlH2O中,用約48ml mol/L HCl調至pH6.8加水稀釋到00ml終體積。過濾后40C保存。這兩種緩沖液必須使用Tris堿制備,再用HCL調節PH值,而不用 Tris.CL。
5、 TEMED原溶液N,N,N’N’四甲基乙二胺催化過硫#銨形成自由基而加速兩種丙稀酰胺的聚合。PH太低時,聚合反應受到抑制。0%(w/v)過硫#胺溶液。提供兩種丙稀酰胺聚合所必須的自由基。去離子水配制數ml,臨用前配制.
6、 SDS- PAGE加樣緩沖液:pH6.8 0.5mol/L Tris緩沖液8ml,甘油6.4ml,0%SDS 2.8ml,巰基乙醇3.2ml,0.05%溴酚藍.6ml,H2O 32ml混勻備用。按:或:2比例與蛋白質樣品混合,在沸水終煮3min混勻后再上樣,一般為20-25ul,總蛋白量00μg。
7、 Tris-甘氨#電泳緩沖液:30.3gTris,88g甘氨#,0gSDS,用蒸餾水溶解至000ml,得0.25mol/L Tris-.92mol/L甘氨#電極緩沖液。臨用前稀釋0倍。
8、 轉移緩沖液:配制L轉移緩沖液,需稱取2.9g甘氨#、5.8gTris堿、0.37g SDS,并加入200ml甲醇,加水至總量L。
9、 麗春紅染液儲存液:麗春紅S 2g 三#乙#30g 磺基水楊# 30g 加水至00ml 用時上述儲存液稀釋0倍即成麗春紅S使用液。使用后應予以廢棄。
0、 脫脂奶粉5%(w/v)。
、 NaN3 0.02% 疊氮鈉(有毒,戴手套操作),溶于磷#緩沖鹽溶液(PBS)。
2、 Tris緩沖鹽溶液(TBS):20mmol/LTris/HCl(pH7.5),500mmol/LnaCl。
3、 Tween20(5)鼠抗人-MMP-9(6)鼠抗人-TIMP-。
4、 過氧化物酶標記的第二抗體。
5、 NBT(溶于70%二甲基甲酰胺,75mg/ml)。
6、 BCIP(溶于00%二甲基甲酰胺,50mg/ml)。
7、 00mmol/LTris-HCl(pH9.5)。
8、 00mmol/L NaCl。
9、 50mmol/LTris-HCl(pH7.5),5mmol/L EDTA。(可以參看分子克隆)

聯系方式

郵箱:goy_shanghai@163.com 地址:上海市嘉定區澄瀏公路52號盛創企業
咨詢熱線

021-39921927

(周一至周日9:00-19:00) 在線咨詢
掃碼加微信
移動端瀏覽
上海谷研實業有限公司©2025版權所有    備案號:滬ICP備12048703號-36 技術支持:環保在線    管理登陸    sitemap.xml
主站蜘蛛池模板: 精品久久一区 | 家庭教师波多野吉衣 | 99久久人妻无码精品系列性欧美 | 九九九色情成人免费网 | 亚洲一区不卡视频 | 成人国产精品 | 欧美 亚洲 在线播放 | 男人大JI巴做爰好爽视频 | 亚洲永久网站 | 福利网址在线观看 | 757午夜| 色婷婷国产精品视频一区二区三区 | 好硬啊进去太深了A片 | 日本久久久久久 | 亚洲国产剧情中文视频在线 | 给我一个可以看片的免费 | 以你的名字呼唤我 | 色综合欧美 | 91视频18 | 日本午夜福利无码高清 | 免费人欧美成又黄又爽的视频 | 亚洲精品在线免费 | 中文字幕在线视频观看 | SM女人捆绑调教网站A片软件 | 日本精品中文字幕有码 | 毛茸茸逼| 比较刺激的H公共场合小说 边吃奶边狠狠躁日韩A片 | 最新国产中文字幕 | 荡公乱妇翠翠 | 五月综合视频 | 快点使劲舒服爽还要高清 | 狠狠躁夜夜躁人人爽A片 | 要色地址| 强奷漂亮的女邻居完整版 | 麻豆传煤官网APP入口 IOS | 韩国免费特一级毛片 | 五月丁香缴情深爱五月天 | 国产成人福利在线视老湿机 | 一级中文字幕乱码免费 | 婷婷在线视频国产综合 | 一本色道久久综合狠狠躁篇 |