小鼠粘蛋白/粘液素7 ELISA試劑盒 使用說(shuō)明書(shū)
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè)，7個(gè)工作日出結(jié)果，提供原始數(shù)據(jù)！
檢測(cè)范圍：每種的檢測(cè)范圍都有所不同,具體請(qǐng)查看說(shuō)明書(shū)
特異性：本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的指標(biāo)，且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
有效期：6個(gè)月
預(yù)期應(yīng)用：ELISA法檢測(cè)指標(biāo)血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中含量或靈敏度。
小鼠粘蛋白/粘液素7 ELISA試劑盒 操作步驟
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí)，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)允箻悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍。
. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?0μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品00μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)20分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加標(biāo)記抗體工作液 00μl（取μl標(biāo)記抗體加99μl標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡-2分鐘，200μl/每孔，甩干。 產(chǎn)品名中文（英文）酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
4. 每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液（同標(biāo)記抗體工作液） 00μl，37℃，60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡-2分鐘，200μl/每孔，甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔顯色不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后5分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
本品用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗HVA抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、化的抗HVA抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的HVA呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。. 酶標(biāo)儀（建議參考儀器使用說(shuō)明提前預(yù)熱）2. 微量加液器及吸頭，EP管3. 蒸餾水或去離子水，全新濾紙
標(biāo)記抗體的稀釋原則：
臨用前以標(biāo)記抗體稀釋液稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔00μl），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.-0.2ml。如0μl標(biāo)記抗體加990μl標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則：
臨用前以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔00μl），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.-0.2ml。如0μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。 . 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：×20ml/瓶。
4. 標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：×0ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：×0ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：×20μl/瓶（：00）
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：×20μl/瓶（：00）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：×0ml/瓶。
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
0. 終止液（Stop Solution）：×0ml/瓶（2N H2SO4）。
公司其他類(lèi)別試劑盒展示：
人羥糖蛋白（HRGP）ELISA試劑盒 Human Hydroxyproline-Rich Glycoprotein,HRGP ELISA試劑盒
人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（GLUT）ELISA試劑盒 Human Glucose transporter ,GLUT ELISA試劑盒
人低密度脂蛋白（LDL）ELISA試劑盒 Human low density lipoprotein,LDL ELISA試劑盒
人花生四烯酸（AA）ELISA試劑盒 Human Arachidonic Acid,AA ELISA試劑盒
人骨涎蛋白（BSP）ELISA試劑盒 Human bone sialoprotein,BSP ELISA試劑盒
人骨堿性磷酸酶（BALP）ELISA試劑盒 Human bone alkaline phosphatase,BALP ELISA試劑盒
人（CTX）ELISA試劑盒 Human Cyclophosphamide,CTX ELISA試劑盒
人,3-二磷酸甘油酸（,3-DPG）ELISA試劑盒 Human ,3-Disphosphoglycerate,,3-DPG ELISA試劑盒
人,5-脫水葡萄糖醇/,5-脫水山梨（,5-AG）ELISA試劑盒 Human ,5-anhydroglucitol,,5-AG ELISA試劑盒
人β羥丁酸（β-OHB）ELISA試劑盒 Human Beta-Hydroxybutyric Acid,β-OHB ELISA試劑盒
人高密度脂蛋白（HDL-C）ELISA試劑盒 Human High density lipoprotein cholesterol,HDL-C ELISA試劑盒
人N端中段骨鈣素（N-MID-OT）ELISA試劑盒 Human N-MID Osteocalcin,N-MID-OT ELISA試劑盒
人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6（LRP-6）ELISA試劑盒 Human low-density lipoprotein-receptor-related protein,LRP-6 ELISA試劑盒