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推薦產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱:芽孢桿菌通用PCR檢測試劑盒品牌
英文名稱:Bacillus spp.PCR
規(guī)格:詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
性能指標(biāo):點擊了解更多PCR檢測試劑盒。
.芽孢桿菌通用PCR檢測試劑盒品牌試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個月
使用方法:
一、芽孢桿菌通用PCR檢測試劑盒品牌樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素:
芽孢桿菌通用PCR檢測試劑盒品牌參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。?Ferrous oxalate dihydrate草低鐵25克3N
Ferrous lactate乳低鐵500毫克BR,90%
Ferrosoferric oxide磁性鐵5克5N,99.999%
Ferron高鐵試劑250克3.5N
Ferrocene環(huán)二鐵25片3N,99.9%
Ferric tartrate酒石鐵(III)250克3N
Ferric phosphate dihydrate磷高鐵二水物5毫克高純
Ferric hydroxide有水鐵克2.7N,99.7%
Ferric citrate枸椽鐵25毫克生物技術(shù)級,90%
Ferene S5,5'-[3-(2-基)-,2,4-三嗪-5,6-二基]二-2-磺二鹽5克3N
FDP,6-二磷果糖三鹽KU超純,99%
FDG代脫氧葡萄糖00毫克AR,99%
FDA二熒光素00克BR,
FCA弗氏*佐劑5克CP,99%
Fast Violet B Salt固紫B鹽0克試劑級,90%
芽孢桿菌通用PCR檢測試劑盒品牌乙酰紫草素 英文名稱:Acetylshikonin CAS號:24502-78- 規(guī)格:20mg
6''-O-丙二酰基染料木苷 英文名稱:6''-O-Malonylgenistin CAS號:50-05-3 規(guī)格:5mg
(-)-丁香樹脂酚-4-O-β-D-葡萄糖苷 英文名稱:Episyringaresinol 4'-O-β-D-glncopyranoside CAS號:37038-3-2 規(guī)格:0mg
白麻苷 英文名稱:Quercetin 3-O-sophoroside CAS號:8609-7- 規(guī)格:20mg
莪術(shù)呋喃二烯酮 英文名稱:Furanodienon CAS號:24268-4-5 規(guī)格:0mg
,7-雙苯-5-羥基-6-庚烯-3-酮 英文名稱:5-Hydroxy-,7-diphenyl-6-hepten-3-one CAS號:87095-74-7 規(guī)格:0mg
堪非醇-3-O-桑布雙糖苷 英文名稱: Leucoside CAS號:2766-5-4 規(guī)格:0mg
去氧紫草素 英文名稱:Deoxyshikonin CAS號:43043-74-9 規(guī)格:0mg
β-乙酰氧基異戊酰阿卡寧 英文名稱:β-Acetoxyisovalerylalkannin CAS號:6909-7-4 規(guī)格:0mg
6''-丙二酸沙苑子苷單酯 英文名稱:Complanatuside 6′′-malonate CAS號: 規(guī)格:0mg
企業(yè)信息
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