人虹膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞注意事項(xiàng):

實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，無菌室及無菌操作臺(tái)（laminarflow）以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)0分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)人虹膜色素上皮細(xì)胞無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時(shí)放置，其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出，以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70%ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之無菌區(qū)域，勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。

小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

工作人員應(yīng)注意自身之安全，須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于來自人類或是病毒感染之細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)之無菌操作臺(tái)（至少ClassⅡ）。操作過程中，應(yīng)避免引起aerosol之產(chǎn)生，小心毒性藥品，例如DMSO及TPA等，并避免尖銳針頭之傷害等。

定期檢測(cè)下列項(xiàng)目：5.CO2鋼瓶之CO2壓力5.2CO2培養(yǎng)箱之CO2濃度、溫度、及水盤是否有污染（水盤的水用無菌水，每周更換）。5.3.無菌操作臺(tái)內(nèi)之airflow壓力，定期更換紫外線燈管及HEPA過濾膜，預(yù)濾網(wǎng)（300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng)，3000小時(shí)/HEPA）。6.水槽可添加消毒劑（Zephrin:750），定期更換水槽的水

 粉末培養(yǎng)基配制好后（加了血清），一般在4度盡量不要超過個(gè)月，如在-20度存放時(shí)間可長一些，但也不要超過3-4個(gè)月，可能對(duì)于永生化細(xì)胞株來說要求不是太高，細(xì)胞嬌弱，放置時(shí)間不宜過長。

 開紫外線照射臺(tái)的時(shí)候，就將培養(yǎng)基、酶、DHANKS液那到室外讓它自然升溫。這樣40分鐘后，溫度也升上來了。有很多人將他放到37度水浴鍋里加熱。一定要注意水浴鍋的衛(wèi)生，有的常年不清洗，里面很臟，容易在外面瓶身上吸附大量細(xì)菌。因此用它的也一定要勤換水。從水浴鍋拿出后，找個(gè)毛巾擦干上面的水。

細(xì)胞 停滯期（Stagnate phase） 細(xì)胞數(shù)量達(dá)到飽和密度后，如不及時(shí)進(jìn)行傳代，細(xì)胞就會(huì)停止增殖，進(jìn)入停止期。此時(shí)細(xì)胞數(shù)持平，故也稱平臺(tái)期（Plateau phase）。停滯期細(xì)胞雖不增殖，但仍有代謝活動(dòng)。如不進(jìn)行分離傳代，細(xì)胞會(huì)因培養(yǎng)液中營養(yǎng)耗盡、代謝產(chǎn)物積聚、pH 下降等因素中毒，出現(xiàn)形態(tài)改變，貼壁細(xì)胞會(huì)脫落，嚴(yán)重的會(huì)發(fā)生死亡，因此，應(yīng)及時(shí)傳代。
公司更多產(chǎn)品信息：360 無菌改良 EC 肉湯（mEC+n）基礎(chǔ) 5ml×0 瓶/箱 用于 O57 增菌
60 新生霉素儲(chǔ)備液 4.5mg×0 支/盒 每支用于 5ml60 中
607 新生霉素儲(chǔ)備液 mg×0 支/盒 每支用于 00ml60 中
60 麥康凱（SMAC）瓊脂 50g/瓶 用于 O57 菌選擇性分離
60 亞碲酸鉀溶液 0.5mg×0 支/盒 各取 支，用于 00ml60 中組 成 CT-SMAC
603 溶液 0.005mg×0 支/盒
360 改良麥康凱（CT-SMAC）瓊脂平板 90mm×0 個(gè)/包 用于 O57 菌選擇性分離
604 月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-MUG（LST-MUG） 000ml/瓶 用于 O57 菌鑒定
608 含 新 生 霉 素 的 緩 沖 胰 蛋 白 胨 大 豆 肉 湯（BTSB+N）基礎(chǔ) 50g/瓶 每 00ml 培養(yǎng)基中添加 支 607
0307 三糖鐵（TSI）瓊脂 50g/瓶 腸桿菌科細(xì)菌生化試驗(yàn)
03 三糖鐵（TSI）瓊脂斜面 4ml×0 支/盒 腸桿菌科細(xì)菌生化試驗(yàn)
00 革蘭氏染色液 0ml×4 支/盒 用于細(xì)菌的革蘭氏染色
00 氧化酶試紙 0 片/瓶 用于氧化酶試驗(yàn)
0309 半固體瓊脂 50g/瓶 用于細(xì)菌動(dòng)力試驗(yàn)
034 半固體瓊脂管 ml×0 支/盒 用于細(xì)菌動(dòng)力試驗(yàn)