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推薦產(chǎn)品
使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。?產(chǎn)品名稱:促生長轉(zhuǎn)ScGH基因成分核酸檢測試劑盒品牌
規(guī)格:48T/盒
類別:熒光-PCR法
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
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性能指標(biāo):點擊了解更多熒光-PCR法。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個月
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。?3-二酰苯硼 50T 低溫運輸,-20℃保存
3-甲酰苯硼 50T 低溫運輸,-20℃保存
氟溴甲烷 50T 低溫運輸,-20℃保存
2-硝苯乙 50T 低溫運輸,-20℃保存
BOC-DL-丙氨 50T 低溫運輸,-20℃保存
四丁基銨(水合物) 50T 低溫運輸,-20℃保存
2-羥基-3,4-二氫吡喃 50T 低溫運輸,-20℃保存
3-(2-啶基)-D-丙氨 50T 低溫運輸,-20℃保存
Boc-3-(4-啶基)-D-丙氨 50T 低溫運輸,-20℃保存
N-苯基雙(三氟甲烷酰)亞胺 50T 低溫運輸,-20℃保存
2,4,6-三氯嘧啶 50T 低溫運輸,-20℃保存
(S)-3-哌啶甲乙酯 50T 低溫運輸,-20℃保存
5-溴-2-甲氧 50T 低溫運輸,-20℃保存
2-氯-6-羥基煙 50T 低溫運輸,-20℃保存
4-氨基四氫吡喃 50T 低溫運輸,-20℃保存
促生長轉(zhuǎn)ScGH基因成分核酸檢測試劑盒品牌parathyroid hormone-like protein,PLP 人甲狀旁腺激素樣蛋白 CAS: 規(guī)格: 500mg
visfatin 人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素 CAS: 52-76-6 規(guī)格: 20mg
apelin 2,AP2 人apelin 2 CAS: 57282-49-2 規(guī)格: 200mg
Glucose dependent insulin releasing polypeptide,GIP 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽 CAS: 657-27-2 規(guī)格: 200mg
Proinsulin,PI 人胰島素原 CAS: 9008-30-4 規(guī)格: 350mg
Insulin Receptor Beta,ISR- Beta 人胰島素受體β CAS: 9004-96-0 規(guī)格: 500mg
Glycated hemoglobin Ac,GHbAc 人糖化血紅蛋白Ac CAS: 9005-00-9 規(guī)格: g
ghcagons-like pepfide ,GLP- 人胰高血糖素樣肽 CAS: 3009-99-9 規(guī)格: 400mg
thyroid stimulating immunoglobulin,TSI 人甲狀腺刺激免疫球蛋白 CAS: 74978-6-8 規(guī)格: 200mg
Parathyroid hormone,PTH 人甲狀旁腺激素 CAS: 546-93-0 規(guī)格: 2g
Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX 人甲肟前列腺素D2 CAS: 779-8-6 規(guī)格: g
Ultrasensitivity Thyroxine,u-T4 人高敏甲狀腺素 CAS: 309-42-8 規(guī)格: g
ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH 人高靈敏度促甲狀腺激素 CAS: 7757-87- 規(guī)格: 2g
dopamine,DA 人多巴胺 CAS: 897-95-8 規(guī)格: 200mg
Azidothymidine,AZT 人 CAS: 557-04-0 規(guī)格: 5g
企業(yè)信息
ENTERPRISE INFORMATION上海谷研實業(yè)有限公司
3004918891發(fā)送信件產(chǎn)品分類
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