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實驗時依次在微孔板中加入樣本及標準品，并加入 HRP 標記的 ABP 抗體，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，反復洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在過氧化物酶的催化下轉化為藍色，再用硫酸終止反應，轉變成黃色。顏色的深淺和樣品中的 ABP含量呈正相關。采用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度（OD 值），根據標準曲線，計算測試樣品中 ABP 濃度。

樣品收集、處理及保存 . 細胞培養上清：適用于檢測體外培養的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以000g離心5分鐘，收集上清。 2. 細胞：用PBS反復洗滌細胞3次，調整細胞濃度達到04-06/ml 左右，通過反復凍融，使細胞破壞并放出細胞內成份，或者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。